Эффекты N

Том 13 научных докладов, Номер статьи: 12502 (2023) Цитировать эту статью

171 Доступ

Подробности о метриках

Изучить влияние антиоксиданта N-ацетилцистеина (NAC) на пролиферацию и апоптоз в эмбриональных клетках дрозофилы S2, интерферирующих с геном CG8005, путем удаления внутриклеточных активных форм кислорода (АФК). Интерферирующая эффективность гена CG8005 в эмбриональных клетках S2 дрозофилы была подтверждена с помощью количественной ПЦР в реальном времени (qRT-PCR). Различные концентрации NAC и фосфатно-солевого буфера (PBS) использовали для воздействия на эмбриональные клетки S2 дрозофилы. Состояние роста эмбриональных клеток S2 дрозофилы наблюдали с помощью светового микроскопа. Два зонда дигидроэтидий (DHE) и 2,7-дихлордигидрофлуоресцеин-ацетоацетат (DCFH-DA) использовали для наблюдения за выработкой АФК в каждой группе после иммунофлуоресцентного окрашивания. Окрашивание TUNEL и проточная цитометрия использовались для исследования уровня апоптоза эмбрионов S2 дрозофилы, а CCK-8 (набор для подсчета клеток-8) использовался для определения жизнеспособности клеток эмбрионов S2 дрозофилы. Эффективность нокдауна фрагмента siCG8005-2 была высокой и стабильной, что подтверждалось эффективностью интерференции (P < 0,05). Не наблюдалось существенных изменений в росте эмбриональных клеток S2 дрозофилы после обработки NAC по сравнению с группой PBS. Более того, нокдаун гена CG8005 приводил к увеличению АФК и апоптоза в эмбриональных клетках S2 дрозофилы (P < 0,05) и снижению пролиферационной активности (P < 0,05). Кроме того, предварительная обработка антиоксидантом NAC может ингибировать выработку АФК в эмбриональных клетках S2 дрозофилы (P <0,05), снижать апоптоз клеток (P <0,05) и улучшать выживаемость клеток (P <0,05). Ген CG8005 в эмбриональных клетках S2 дрозофилы может регулировать пролиферацию и апоптоз эмбриональных клеток S2, нарушая окислительно-восстановительный гомеостаз, а антиоксидант NAC может ингибировать апоптоз клеток и способствовать пролиферации клеток путем удаления АФК в эмбриональных клетках S2 дрозофилы, что, как ожидается, обеспечит новые понимание патогенеза мужского бесплодия и сперматогенеза.

Внутриклеточный окислительно-восстановительный гомеостаз, который относится к динамическому балансу между окислительными и восстанавливающими видами, играет решающую роль в поддержании нормальных физиологических процессов, включая рост клеток, метаболизм, апоптоз и пролиферацию1,2. Когда организм подвергается вредным раздражителям, окислительная система и антиоксидантная система выходят из равновесия и затем имеют тенденцию к окислительному действию, что приводит к инфильтрации нейтрофилов, секреции протеаз и выработке большого количества окислительных промежуточных продуктов3,4. Активные формы кислорода (АФК) – это общий термин для обозначения активных кислородсодержащих соединений, включающих гидроксильный радикал (·OH), перекись водорода (H2O2) и супероксидный радикал (O2-), которые образуются в процессе окислительного метаболизма5,6,7 . В нормальных условиях организм может производить небольшое количество АФК для поддержания баланса кислородного метаболизма под действием ферментов, улавливающих свободные радикалы, и антиоксидантов8,9. Однако после вредных раздражителей может вырабатываться большое количество АФК, что вызывает нарушение окислительно-восстановительного гомеостаза и в конечном итоге способствует возникновению окислительного стресса10. В последние годы накапливаются данные, показывающие, что окислительный стресс тесно связан с возникновением клеточной пролиферации и апоптоза. Лечение оксидантами может индуцировать апоптоз и ингибировать пролиферацию клеток, тогда как использование антиоксидантов может уменьшить апоптоз и повысить жизнеспособность клеток11,12. N-ацетилцистеин (NAC), тиолсодержащий антиоксидант и предшественник глутатиона (GSH), может ослаблять окислительный стресс за счет удаления свободных радикалов и стимуляции активности антиоксидантных ферментов13,14. Есть сообщение, что использование NAC также было связано со значительным снижением перекисного окисления липидов и значительным увеличением уровней GSH в печени и эритроцитах мышей15.